葡萄膜炎(Uveitis)是眼科領(lǐng)域中常見的一種疾病，容易復(fù)發(fā)，嚴重時可致盲。葡萄膜炎的發(fā)病機制較復(fù)雜，而氧化應(yīng)激在其中起到一定作用。激素及免疫抑制劑是目前臨床上改善葡萄膜炎常用的藥物，但對于反復(fù)發(fā)作的葡萄膜炎，長期使用上述藥物有時會給患者帶來嚴重的副作用。

分子氫(molecular hydrogen，H2)是新近發(fā)現(xiàn)的一種抗氧化劑，具有選擇性抗氧化、抗炎、抗凋亡等特性，對多種疾病起到一定的防治效果，具有潛在的臨床應(yīng)用價值。目前未見報道氫氣對葡萄膜炎是否具有改善作用。內(nèi)毒素誘導(dǎo)性葡萄膜炎是進行葡萄膜炎發(fā)病機制、藥物改善等方面研究的常用動物模型，其發(fā)病機制也涉及氧化應(yīng)激。因此，本實驗采用內(nèi)毒素誘導(dǎo)性大鼠葡萄膜炎模型，通過腹腔注射氫飽和生理鹽水(氫水，HRS)和吸入氫氣兩種方式進行試驗性改善，觀察氫氣對葡萄膜炎是否有改善作用，探索葡萄膜炎改善的新措施。

材料與方法：

實驗一：健康成年雄性SD大鼠24只，隨機分為正常組、模型組、激素組和氫水組，每組6只，于后三組大鼠后足足底皮下注射內(nèi)毒素 1 mg/kg誘導(dǎo)葡萄膜炎。激素組于造模后立即腹腔注射地塞米松磷酸鈉注射液1 mg/kg，氫水組于造模后立即腹腔注射氫水10 ml/kg，正常組和模型組不給予藥物處理。四組于造模后24小時在裂隙燈下觀察，并按葡萄膜炎體征進行量化評分;取房水進行房水蛋白定量，同時行眼球病理組織學(xué)檢查，并對虹膜睫狀體處浸潤的炎癥細胞進行計數(shù)。

實驗二：健康成年雄性SD大鼠24只，隨機分為正常組、模型組、激素組和氫水組，每組6只，于后三組大鼠后足足底皮下注射內(nèi)毒素 1 mg/kg誘導(dǎo)葡萄膜炎。激素組于造模后立即腹腔注射地塞米松磷酸鈉注射液1 mg/kg，氫水組于造模前1周每天一次以及造模后0，0.5，1，2，6，8，12小時腹腔注射氫水20 ml/kg。四組于造模后24小時在裂隙燈下觀察，并按葡萄膜炎體征進行量化評分;取房水進行房水蛋白定量，并行眼球病理組織學(xué)檢查，并對虹膜睫狀體處浸潤的炎性細胞進行計數(shù)。

實驗三：健康成年雄性SD大鼠隨機分為正常組、模型組、激素組和氫水組，于后三組大鼠后足足底皮下注射內(nèi)毒素 1/8 mg/kg誘導(dǎo)葡萄膜炎。激素組于造模后立即腹腔注射地塞米松磷酸鈉注射液1 mg/kg，氫水組于造模前1周每天一次以及造模后0，0.5，1，2，6，8，12，24小時和3周內(nèi)每天一次腹腔注射氫水20 ml/kg。四組于造模后12，24，48，72，96小時在裂隙燈下觀察，并按葡萄膜炎體征進行量化評分;并于造模后1，4，7，10，14和21天行視網(wǎng)膜電圖檢查、房水蛋白定量及眼球病理組織學(xué)檢查，并對虹膜睫狀體處浸潤的炎性細胞進行計數(shù)。

實驗四：健康成年雄性SD大鼠隨機分為正常組、模型組、氮氧組(給予吸入66.7%氮氣和33.3%氧氣混合氣體)和氫氧組(給予吸入66.7%氫氣和33.3%氧氣混合氣體)，于后三組大鼠后足足底皮下注射內(nèi)毒素 1/8 mg/kg誘導(dǎo)葡萄膜炎。氮氧組、氫氧組于造模后0，1小時和3周內(nèi)每天一次吸入相應(yīng)混合氣體1小時。四組于造模后12，24，48，72，96小時在裂隙燈下觀察，并按葡萄膜炎體征進行量化評分;并于造模后1，4，7，10，14和21天行視網(wǎng)膜電圖檢查、房水蛋白定量及眼球病理組織學(xué)檢查，并對虹膜睫狀體處浸潤的炎性細胞進行計數(shù)。

研究結(jié)果：實驗一在本實驗條件下，正常組大鼠眼部未見有葡萄膜炎體征，模型組大鼠在注射1 mg/kg 內(nèi)毒素 24小時后眼部出現(xiàn)虹膜充血、房水閃輝以及前房積膿等典型葡萄膜炎體征，量化評分為6.00±0.37分，虹膜睫狀體處炎癥細胞計數(shù)為200.33±10.54個，房水蛋白總量為21.17±4.15 mg/ml，各指標相對于正常組大鼠(0.17±0.11分，0.67±0.21個和0.48±0.05 mg/ml)均明顯升高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，表明疾病模型建立成功。

氫水組大鼠有明顯的葡萄膜炎體征，裂隙燈下葡萄膜炎體征量化評分、炎癥細胞計數(shù)分別為5.50±0.29分和198.50±8.73個，與模型組對應(yīng)指標間差異均未見統(tǒng)計學(xué)意義;氫水組房水蛋白總量為14.65±2.95 mg/ml，較模型組低，但二者間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

實驗二氫水組大鼠葡萄膜炎炎癥程度與模型組相似，兩組裂隙燈下葡萄膜炎體征量化評分、炎癥細胞計數(shù)分別為5.58±0.35和5.61±0.44分，189.50±13.93和192.33±9.45個，兩組數(shù)據(jù)間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義;氫水組房水蛋白總量較模型組低(分別為12.17±3.23和16.60±2.30 mg/ml)，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

實驗三模型組大鼠在注射1/8 mg/kg 內(nèi)毒素 24小時后出現(xiàn)典型的葡萄膜炎體征，量化評分為3.82±0.40分，虹膜睫狀體處炎癥細胞計數(shù)為143.33±10.54個，房水蛋白總量為4.44±0.05 mg/ml，各指標均較之前注射1 mg/kg 內(nèi)毒素誘導(dǎo)的模型減輕，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，表明減少內(nèi)毒素的劑量能適當(dāng)減輕EIU模型的炎癥程度;氫水組大鼠葡萄膜炎炎癥程度與模型組相似，96小時內(nèi)各時間點裂隙燈下葡萄膜炎體征量化評分、21天內(nèi)虹膜睫狀體炎癥細胞計數(shù)與模型組間差異均未見統(tǒng)計學(xué)意義;氫水組24小時房水蛋白總量為3.57±0.19 mg/ml，較模型組低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);氫水組造模后4到14天內(nèi)視網(wǎng)膜電圖暗適應(yīng)3.0反應(yīng)b波潛伏期較模型組小，但差異均未見統(tǒng)計學(xué)意義。

實驗四氫氧組大鼠葡萄膜炎炎癥程度與模型組、氮氧組相似，三組各時間點裂隙燈下葡萄膜炎體征量化評分、虹膜睫狀體處炎癥細胞計數(shù)間差異未見有統(tǒng)計學(xué)意義);氫氧組24小時房水蛋白總量較模型組和氮氧組低(分別為3.34±0.46，4.47±0.12和4.28±0.08 mg/ml)，氫氧組與后兩組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);三組間21天內(nèi)視網(wǎng)膜電圖暗適應(yīng)3.0反應(yīng)b波潛伏期差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

研究結(jié)論：在本實驗條件下，氫氣對內(nèi)毒素誘導(dǎo)性大鼠葡萄膜炎的眼部體征、病理組織學(xué)及視網(wǎng)膜功能改變沒有明顯減輕作用。這可能與氫氣能選擇性清除的羥自由基等強性氧自由基在EIU氧化應(yīng)激中不占主導(dǎo)成分、大鼠眼內(nèi)組織特別是葡萄膜對內(nèi)毒素具有高敏感性有關(guān)。而氫氣對房水蛋白升高有一定的抑制作用，可能與氫氣在一定程度上抑制誘導(dǎo)房水蛋白滲出的炎癥因子有關(guān)。