

氫氣曾經(jīng)被認(rèn)為是惰性氣體,對人和動物沒有生理和藥理學(xué)作用,但是這一概念已經(jīng)被推翻,研究發(fā)現(xiàn)氫氣具有非常好的生物學(xué)效應(yīng),能調(diào)節(jié)多種氧化應(yīng)激相關(guān)疾病。有大量動物疾病模型和人體試驗(yàn)都先后證明,氫氣在預(yù)防和調(diào)節(jié)疾病方面可能具有非常強(qiáng)的應(yīng)用前景。但是至今對氫氣抗損傷的細(xì)節(jié)和分子機(jī)制仍然存在不清楚不完善的問題。本研究主要研究氫氣對自由基誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性保護(hù)作用,采用叔丁基氫過氧化物(TBHP)處理人類急性單核細(xì)胞的白血病細(xì)胞株THP-1。TBHP是一類有機(jī)過氧化物,是一種穩(wěn)定的誘導(dǎo)自由基的化學(xué)物質(zhì),本研究作為細(xì)胞自由基損傷的誘導(dǎo)物質(zhì)。細(xì)胞損傷細(xì)胞膜通透性增加,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)乳酸脫氫酶釋放。Hoechst33342/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒。Hoechst33258能被活細(xì)胞攝取,與DNA結(jié)合,在紫外線下呈藍(lán)色熒光。PI則能跨膜擴(kuò)散到壞死細(xì)胞內(nèi),使死細(xì)胞著色產(chǎn)生紅色熒光。在散點(diǎn)圖上結(jié)果為:正常細(xì)胞呈低藍(lán)/紅光,凋亡細(xì)胞呈高藍(lán)/低紅光,壞死細(xì)胞呈低藍(lán)/高紅光。使用C11-BODIPY和alamarBlue兩種熒光染料,分別分析脂肪酸過氧化反應(yīng)和線粒體活力測定。線粒體膜電位使用四甲基羅丹明甲酯(TMRM) 檢測。
研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),氫氣對TBHP導(dǎo)致細(xì)胞毒性反應(yīng)有保護(hù)作用,氫氣抑制細(xì)胞脂肪酸過氧化,降低細(xì)胞膜滲透率。氫氣也能緩解線粒體氧化還原酶活性和線粒體膜電下降。PI染色顯示氫氣能避免細(xì)胞死亡。
研究結(jié)果提示,氫氣能通過減少自由基誘導(dǎo)的脂肪酸過氧化,避免細(xì)胞死亡和線粒體功能障礙。