隨著社會發(fā)展,慢性腎臟病日益成為影響數(shù)百萬人的世界性公共衛(wèi)生問題,且近年來發(fā)病率迅速增加。在中國大陸,慢性腎臟病發(fā)病率約10.8%,我國約有1.3億慢性腎臟病患者。慢性腎臟病持續(xù)進(jìn)展的共同結(jié)局即終末期腎臟病。終末期腎臟病患者需采取腎臟替代治療,目前主要的腎臟替代治療手段包括血液透析、腹膜透析和腎移植。腹膜透析因其較高的早期存活率,良好的殘余腎功能保護(hù)作用,對心血管系統(tǒng)影響小,避免反復(fù)的血管穿刺等優(yōu)點(diǎn)被越來越多的患者選擇。中國研究數(shù)據(jù)服務(wù)平臺CNRDS的數(shù)據(jù)顯示,2019年腹膜透析的在透患者為103348人,數(shù)量比2012年增長了近兩倍。盡管腹膜透析明顯改善了終末期腎臟病患者的預(yù)后,但仍存在諸多并發(fā)癥,最終造成腹膜透析技術(shù)失敗。腹膜透析液中葡萄糖降解產(chǎn)物的積累觸發(fā)氧化應(yīng)激,從而導(dǎo)致腹膜發(fā)生間皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)變,腹膜功能障礙將影響腹膜超濾功能。根據(jù)國際腹膜透析協(xié)會規(guī)定,2000ml 4.25%的葡萄糖透析液留腹4h后超濾量小于400ml即為超濾衰竭。超濾衰竭是腹膜透析的嚴(yán)重并發(fā)癥之一,目前臨床上能夠改善或者治療超濾衰竭的手段非常匱乏。分子氫具有良好的抗氧化應(yīng)激和抗炎癥反應(yīng)作用,且潛水醫(yī)學(xué)研究證明,治療劑量數(shù)百倍的氫氣對人體也是安全的,已被廣泛應(yīng)用于多種疾病的治療。飲用富氫水能減輕草酸鹽誘導(dǎo)的結(jié)晶腎損傷,在高糖誘導(dǎo)的腹膜纖維化模型中,分子氫能有效抑制腹膜間皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)變,減少不良事件的發(fā)生。本研究將探討分子氫對腹膜透析患者腹膜超濾功能的影響。第一部分單中心腹膜透析患者透析充分性和超濾功能的回顧性研究目的:研究單中心腹膜透析人群隨著透齡增加透析充分性和腹膜超濾功能的改變。
方法:對長海醫(yī)院腹膜透析中心1996年8月至2021年3月期間隨訪數(shù)據(jù)完整的病例進(jìn)行回顧性分析,分別記錄每位患者隨訪期內(nèi)的尿素清除指數(shù)、超濾量及腹膜平衡試驗結(jié)果,記錄患者生存狀況。根據(jù)患者年齡、性別、原發(fā)疾病分為不同組別,研究單中心腹膜透析人群的透析充分性及超濾功能變化,并繪制生存曲線。結(jié)果:共收集數(shù)據(jù)完整的病例735例,其中男性412人,女性323人,平均年齡53.31±15.55歲?；颊咂骄鹗寄蛩厍宄笖?shù)為2.2,透析第60個月平均尿素清除指數(shù)為1.8,第100個月后波動于1.7～2.1之間;平均起始超濾量為+155ml,透析第100個月時升至+800ml,第100個月后超濾量逐漸下降,第174個月時,超濾量為+570ml;D/Pcr在透析第0～150個月之間始終圍繞0.65波動;高平均轉(zhuǎn)運(yùn)+高轉(zhuǎn)運(yùn)患者在透析起始狀態(tài)所占比例為46.77%,透析第123個月,高平均轉(zhuǎn)運(yùn)+高轉(zhuǎn)運(yùn)患者所占比例為53.85%,透析第168個月后,高平均轉(zhuǎn)運(yùn)+高轉(zhuǎn)運(yùn)患者所占比例為100%。老年、男性、糖尿病患者生存曲線較其他人群下降更快(P<0.05)。結(jié)論:隨著患者透齡增加,腹膜透析患者存在透析充分性和超濾功能的減退,其中老年、男性、糖尿病群體面臨更大的風(fēng)險。第二部分長程氫氣吸入對腹膜透析超濾功能的影響目的:觀察長程氫氣吸入對腹膜透析超濾功能的影響。方法:入組符合條件的腹膜透析患者予以氫氣吸入,流量為300ml/min,氫氣體積分?jǐn)?shù)為99.82%,時間為6h/日,持續(xù)1年,同時予以基礎(chǔ)治療。對比吸氫前后患者超濾量的變化,流出液中血管內(nèi)皮生長因子A和血小板衍生生長因子BB濃度的變化。
結(jié)果:腹膜透析患者平均吸氫8.6周后超濾量增加中位數(shù)為80ml,吸氫16.8周后超濾量增加中位數(shù)為125ml。腹膜透析引流液中血管內(nèi)皮生長因子A基線濃度中位數(shù)為383.90 pg/ml,吸氫8.6周后濃度中位數(shù)為224.80 pg/ml,吸氫16.8周后濃度中位數(shù)為121.40 pg/ml;腹膜透析引流液中血小板衍生生長因子BB基線濃度中位數(shù)為72.75 pg/ml,吸氫8.6周后濃度中位數(shù)為40.90 pg/ml,吸氫16.8周后濃度中位數(shù)為39.65 pg/ml。結(jié)論:吸氫能夠改善超濾功能,減少腹膜血管新生。第三部分分子氫改善腹膜透析超濾功能的實驗研究目的:探討分子氫改善腹膜透析超濾功能的相關(guān)機(jī)制,為超濾衰竭的預(yù)防和治療提供新的靶點(diǎn)。方法:將24只7～8周齡的C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為氯化鎂組(鎂離子對照)、高糖+氯化鎂組(模型)、高糖+氫化鎂組(治療)、氫化鎂組(正常對照)。高糖干預(yù)方式為4.25%高糖腹膜透析液2ml腹腔注射,氯化鎂干預(yù)方式為183mg/kg氯化鎂溶液0.1ml灌胃,氫化鎂干預(yù)方式為50mg/kg氫化鎂懸濁液0.1ml灌胃(產(chǎn)氫2.125ml),持續(xù)28天,構(gòu)建高糖誘導(dǎo)的腹膜透析功能障礙模型。進(jìn)行病理染色測量各組小鼠腹膜間皮下厚度,計算Masson染色膠原容積分?jǐn)?shù)。通過腹膜重吸收實驗評估小鼠腹膜功能。通過免疫組化檢測不同來源腹膜組織的PTEN表達(dá)情況。應(yīng)用生物信息學(xué)分析預(yù)測Lnc RNA GAS5作用于PTEN的靶點(diǎn),并在Met-5A細(xì)胞中構(gòu)建過表達(dá)或干擾GAS 5表達(dá)的細(xì)胞株,驗證GAS 5對PTEN的作用,探索分子氫改善腹膜透析超濾功能的可能機(jī)制。
結(jié)果:高糖刺激后,間皮下厚度中位數(shù)為78.38nm,而在給予分子氫干預(yù)后,間皮下厚度中位數(shù)為23.03nm。高糖刺激后,腹膜膠原容積分?jǐn)?shù)中位數(shù)為41.6%,分子氫干預(yù)后,腹膜膠原容積分?jǐn)?shù)中位數(shù)為20.0%。腹膜重吸收實驗中高糖+氯化鎂組重吸收率為76.00±21.10%,高糖+氫化鎂組為91.50±2.30%。高糖刺激下腹膜PTEN表達(dá)量降低,分子氫干預(yù)后PTEN表達(dá)回調(diào),GAS5與PTEN同向變化。GAS5通過競爭性結(jié)合mi R-23a-3p調(diào)控PTEN在腹膜組織上的表達(dá)。結(jié)論:吸氫能夠減輕高糖誘導(dǎo)的腹膜纖維化,并改善腹膜重吸收功能。分子氫能部分逆轉(zhuǎn)高糖刺激下PTEN的下調(diào),這一分子機(jī)制可能是GAS5/mi R-23a-3p/PTEN的ce RNA作用介導(dǎo)的。