呼吸氫氣對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎動(dòng)物的治療作用

中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)和大范圍的髓鞘脫失以及軸索損傷是多發(fā)性 硬化和實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的病理學(xué)特點(diǎn)。氫氣作為一種新型抗氧化劑越來越 受到人們重視。本實(shí)驗(yàn)擬采用實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎動(dòng)物為研究對(duì)象，通過給與 高濃度氫氣吸入方式，探討氫氣對(duì)于實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎動(dòng)物的治療作用。

 
氫氣是自然界中一種無色無味的氣體。近年來發(fā)現(xiàn)氫氣具有選擇性抗氧化作用， 因?yàn)榘踩?jiǎn)單，可能適用于多種急慢性病的治療。由于氫氣分子量小且缺乏極性，使 得氫分子具有強(qiáng)大的組織擴(kuò)散能力，可迅速穿過血腦屏障抵達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。但擴(kuò)散 能力強(qiáng)也容易降低氫氣的體內(nèi)存留時(shí)間和劑量，采用吸入氫氣的方法可保證在體存留 時(shí)間和給氣劑量，對(duì)于發(fā)揮氫氣的治療作用有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。
 
方法：建立實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎動(dòng)物模型，采用隨機(jī)數(shù)字表法共分為 4 組 （n=12）：正常組（Ctrl 組），實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎組（EAE 組），實(shí)驗(yàn)性自身 免疫性腦脊髓炎吸入高濃度氫氣組（EAE+HCH 組），實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎吸 入氮氧混合氣組（EAE+HCN 組）。EAE+HCH 組和 EAE+HCN 組小鼠自致免后第 12 天開始每日吸入氫氧混合氣或氮氧混合氣 2 個(gè)小時(shí)。每日進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分和體重 稱量；致免后第 21 天進(jìn)行老鼠處死和組織取材的工作，采用 H&E 染色和勒克斯速藍(lán) （Luxol fast blue, LFB）染色進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)的觀察評(píng)分；采用免疫組化方法觀察脊髓中 T 細(xì)胞數(shù)量的變化；通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)脊髓勻漿裂解液中炎性因子含量改變。
 

結(jié)果：與 Ctrl 組相比，EAE 組第 9 天開出現(xiàn)尾部肌肉張力喪失，逐漸擴(kuò)散到單或 雙下肢，同時(shí)伴隨體重下降，組織形態(tài)學(xué)觀察到中樞神經(jīng)系統(tǒng)腰膨大部分炎性細(xì)胞浸 潤(rùn)和大量脫髓鞘和軸索損傷，相同切片區(qū)域中大量 CD4+ T 細(xì)胞浸潤(rùn)，脊髓裂解液中 炎性因子 TNF-α、IFNγ 和 IL-1β 含量升高；與 EAE 組相比，EAE+HCN 組各種檢測(cè) 指標(biāo)均未見明顯改變；與 EAE 組相比，EAE+HCH 組神經(jīng)行為學(xué)和體重缺失有所緩 解，中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和脫髓鞘情況得到明顯改善，T 細(xì)胞數(shù)量減少，炎性 因子 TNF-α、IFNγ 和 IL-1β 含量降低而抗炎因子 IL-10 含量升高。
 
結(jié)論：氫氣吸入能改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和脊髓髓鞘脫失，減少中樞神 經(jīng)系統(tǒng) T 細(xì)胞浸潤(rùn)，降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥水平。結(jié)果顯示，吸入高濃度氫氣對(duì)實(shí)驗(yàn) 性自身免疫性腦脊髓炎具有治療效應(yīng)。