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目前,放射治療廣泛應(yīng)用于臨床腫瘤的治療,射線在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)損傷正常組織。有研究表明氫是一種具有前景的治療相關(guān)疾病的方法。[目的]探究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶9(Caspase-9)信號(hào)通路在富氫水對(duì)急性放射性腦損傷中的作用及機(jī)制。 [方法]將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、單純照射(IR)組、高劑量富氫水干預(yù)(IR+HHRW)組、低劑量富氫水干預(yù)(IR+LHRW)組,每組10只。除對(duì)照組外,其余組動(dòng)物均接受單次20 Gy全腦照射。各組動(dòng)物均在照射前3 d至照射后7 d內(nèi),每天灌胃1次,對(duì)照組和IR組給予純凈水(20 mL·kg-1),IR+HHRW組和IR+LHRW組給予富氫水(20 mL·kg-1、10 mL·kg-1)。照射7 d后每組各取5只大鼠進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)行為學(xué)變化;剩余動(dòng)物麻醉后剖殺、采血、取腦組織檢測(cè)血液指標(biāo)變化,進(jìn)行TUNEL染色觀察神經(jīng)細(xì)胞凋亡情況,蘇木精和伊紅(HE)染色觀察組織病理學(xué)變化,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)氧化應(yīng)激指標(biāo)的變化,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blotting法檢測(cè)PI3K、AKT、細(xì)胞色素C(Cytc)、Caspase-9的mRNA和蛋白的表達(dá)。 [結(jié)果]照后第7天,與對(duì)照組相比,各照射組大鼠體重均降低(P <0.05),并且出現(xiàn)了不同程度的弓背、精神萎靡等癥狀,IR+HHRW組大鼠較IR組大鼠以上癥狀明顯更輕。行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示:第2~5天IR+HHRW組或IR+LHRW組大鼠相對(duì)于IR組逃避潛伏期縮短(P <0.05),且IR+HHRW組大鼠在第6天撤去平臺(tái)后到達(dá)平臺(tái)原來(lái)位置所用時(shí)間減少(P <0.05)。血液學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示,IR組紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù)、血紅蛋白(HGB)量、白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)均降低(P <0.05),IR+HHRW組RBC、HGB、WBC指標(biāo)均有所改善(P <0.05)。HE染色結(jié)果顯示:IR+HHRW組較IR組的異常神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量以及碎裂、溶解的細(xì)胞核明顯減少,損傷程度更輕。氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示:IR組抑制自由基能力降低,丙二醛(MDA)水平增高(P <0.01);LHRW干預(yù)后,MDA水平降低(P <0.05);HHRW干預(yù)后,SOD活力升高(P <0.05)。TUNEL染色結(jié)果顯示:IR+HHRW組凋亡信號(hào)較IR組稀疏。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示:與IR組相比,IR+HHRW組和IR+LHRW組PI3K、AKT的mRNA表達(dá)水平升高(P <0.05),而Cytc和Caspase-9的mRNA表達(dá)水平降低(P <0.05)。Western blotting結(jié)果顯示:與IR組相比,IR+HHRW組磷酸化AKT(pAKT)表達(dá)量增加(P <0.05),而Caspase-9和Cytc蛋白表達(dá)量降低(P <0.05)。 [結(jié)論]富氫水干預(yù)可顯著減輕急性放射性腦損傷引起的炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng),并減輕神經(jīng)細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能與調(diào)控PI3K/AKT/Caspase-9信號(hào)通路有關(guān)。
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