目的 評(píng)價(jià)磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信號(hào)通路在富氫水(HRS)減輕心肺轉(zhuǎn)流(CPB)致大鼠心肌損傷中的作用。

方法 清潔級(jí)成年雄性SD大鼠40只，10～12周齡，體重350～400 g。采用隨機(jī)數(shù)字表法分為四組：假手術(shù)組(S組)、CPB組(C組)、HRS處理組(H組)和PI3K抑制劑組(P組),每組10只。S組僅進(jìn)行血管穿刺置管，置管后通過尾靜脈注射生理鹽水6 ml/kg,機(jī)械通氣90 min,其余各組建立無血預(yù)充心臟不停跳CPB模型，CPB 60 min。CPB前60 min, P組通過腹腔內(nèi)注射PI3K抑制劑6 ml/kg(LY294002,5μg/ml)。CPB前30 min, C組通過尾靜脈注射生理鹽水6 ml/kg, H組和P組通過尾靜脈注射HRS 6 ml/kg。四組均于CPB停機(jī)2 h后取相應(yīng)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。采用Masson染色法觀察心肌組織形態(tài)學(xué)變化；測(cè)定大鼠心肌含水量；采用ELISA法測(cè)定血漿心肌損傷標(biāo)記物[心肌肌鈣蛋白I(cTnI)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]和炎性因子[白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)]以及心肌組織氧化應(yīng)激指標(biāo)[丙二醛(MDA)、髓過氧化物酶(MPO)、氧化物歧化酶(SOD)]濃度；采用Western blot法檢測(cè)心肌組織凋亡相關(guān)蛋白[B細(xì)胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)x蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)]及PI3K信號(hào)通路相關(guān)蛋白[PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、血紅素加氧酶-1(HO-1)]含量。結(jié)果 S組心肌組織結(jié)構(gòu)基本正常，C組心肌纖維化且明顯損傷，H組心肌纖維損傷得到改善。與H組比較較，P組大鼠心肌損傷程度較為嚴(yán)重。與S組比較，C組、H組和P組心肌含水量、血漿cTnI、LDH、CK-MB和IL-1β、IL-6、TNF-α濃度、心肌組織MDA、MPO濃度、Bax、caspase-3蛋白含量明顯升高(P<0.05),SOD濃度、Bcl-2和PI3K、p-Akt、HO-1蛋白含量明顯降低(P<0.05)。與C組比較，H組心肌含水量、血漿cTnI、LDH、CK-MB和IL-1β、IL-6、TNF-α濃度、心肌組織MDA、MPO濃度、心肌組織Bax、caspase-3蛋白含量明顯降低(P<0.05),心肌組織SOD濃度、Bcl-2和PI3K、p-Akt、HO-1蛋白含量明顯升高(P<0.05)。與H組比較，P組心肌含水量、血漿cTnI、LDH、CK-MB和IL-1β、IL-6、TNF-α濃度、心肌組織MDA、MPO濃度、心肌組織Bax、caspase-3蛋白含量明顯升高(P<0.05),心肌組織SOD濃度、心肌組織Bcl-2和PI3K、p-Akt、HO-1蛋白含量明顯降低(P<0.05)。C組和P組上述指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)論 HRS減輕CPB致大鼠心肌損傷的機(jī)制與激活PI3K/Akt信號(hào)通路有關(guān)。