該內(nèi)容主要參考論文：李號(hào)令, 周亞蘭, 周書轉(zhuǎn), 等. 氫氣對(duì)單關(guān)節(jié)炎大鼠的保護(hù)作用[J]. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2019, 40(11): 1258-1262.
 

目的觀察經(jīng)呼吸道吸入氫氣對(duì)單關(guān)節(jié)炎大鼠的保護(hù)作用。方法 40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組：?jiǎn)侮P(guān)節(jié)炎組、單關(guān)節(jié)炎+氫氣0~14 d組、單關(guān)節(jié)炎+氫氣0~3 d組、單關(guān)節(jié)炎+氫氣4~14 d組、假手術(shù)+氫氣0~14 d組，每組8只。于大鼠左側(cè)踝關(guān)節(jié)腔注射完全弗氏佐劑(CFA)建立單關(guān)節(jié)炎模型。單關(guān)節(jié)炎組大鼠不吸入氫氣，另4組大鼠分別在造模當(dāng)天及造模后第1~14天每天吸入65%氫氣1.5 h、在造模當(dāng)天及造模后第1~3天每天吸入65%氫氣1.5 h、在造模后第4~14天每天吸入65%氫氣1.5 h、在假手術(shù)當(dāng)天及造模后第1~14天每天吸入65%氫氣1.5 h。采用von Frey纖毛測(cè)定單關(guān)節(jié)炎大鼠雙側(cè)后爪在建模后0、1、3、5、7、10、14 d的機(jī)械刺激抬腿反應(yīng)閾值(PWT)。另取15只大鼠分為5組，每組3只，于造?；蚣偈中g(shù)后第10天取致炎側(cè)脊髓腰膨大組織，用大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒分別檢測(cè)致炎側(cè)脊髓組織中SOD、CAT、MDA的含量。P < 0.01)。單關(guān)節(jié)炎+氫氣0~14 d組和單關(guān)節(jié)炎+氫氣0~3 d組大鼠致炎側(cè)后爪PWT均高于單關(guān)節(jié)炎組致炎側(cè)(P < 0.01);單關(guān)節(jié)炎+氫氣4~14 d組大鼠致炎側(cè)后爪PWT與單關(guān)節(jié)炎組致炎側(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均 < 0.05)，MDA水平低于單關(guān)節(jié)炎組(P均>0.05)。<b style="宋體"orphans: 2;-webkit-text-stroke-width: 0px;word-spacing:0px">結(jié)論經(jīng)呼吸道吸入65%氫氣在大鼠單關(guān)節(jié)炎模型的起始階段可減輕機(jī)械痛敏及氧化應(yīng)激，預(yù)先給予氫氣可抑制單關(guān)節(jié)炎機(jī)械痛敏的形成。
 

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎所致的疼痛是一種慢性炎性疼痛，其發(fā)病與自身免疫調(diào)節(jié)功能失調(diào)及氧化應(yīng)激平衡異常密切相關(guān)[1]。目前類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的改善過(guò)多地注重于免疫調(diào)節(jié)而忽略了對(duì)體內(nèi)氧化應(yīng)激平衡異常的干預(yù)，大量免疫調(diào)節(jié)藥物的應(yīng)用導(dǎo)致了一系列問(wèn)題，如心血管并發(fā)癥的發(fā)生率升高等[2]。氫氣是分子結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的物質(zhì)，在人體內(nèi)能發(fā)揮抗炎、抗氧化、抗凋亡、抗過(guò)敏的作用[3]，研究還發(fā)現(xiàn)氫氣對(duì)組織器官缺血再灌注、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病及腫瘤等疾病有著顯著的改善效果[4-7]。然而，關(guān)于氫氣對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎所致的慢性炎性疼痛改善作用的研究很少。本研究采用完全弗氏佐劑(completeFreund’s adjuvant，CFA)制備大鼠單關(guān)節(jié)炎模型，使用氫氧霧化機(jī)經(jīng)呼吸道給予大鼠氫氣與氧氣的混合氣體(氫氣體積占混合氣體總體積的比例為65%)，觀察氫氣對(duì)單關(guān)節(jié)炎大鼠是否具有保護(hù)作用并初步探索其作用機(jī)制。
 

該研究判斷有效性的主要指標(biāo)是械刺激抬腿反應(yīng)閾值(pawwithdrawal threshold，PWT)測(cè)定。我們重點(diǎn)探討一下這個(gè)內(nèi)容，這有利于大家理解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)如何開展，我個(gè)人也對(duì)這個(gè)研究結(jié)果進(jìn)行了分析。
 

如果是人體試驗(yàn)，可以通過(guò)問(wèn)卷的方式，詢問(wèn)患者疼痛是否好轉(zhuǎn)，但動(dòng)物不會(huì)說(shuō)話，如何判斷疼痛程度，這需要痛覺(jué)敏感測(cè)試方法。本研究中采用的機(jī)械痛測(cè)試方法，基本邏輯是關(guān)節(jié)炎導(dǎo)致疼痛過(guò)敏，通過(guò)測(cè)試動(dòng)物痛過(guò)敏的程度來(lái)確定關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度。作為判斷氫氣吸入對(duì)關(guān)節(jié)炎效果的依據(jù)。
 

關(guān)節(jié)炎等外周組織炎癥常引起持續(xù)性自發(fā)痛、痛覺(jué)過(guò)敏和痛覺(jué)超敏等病理性疼痛。痛覺(jué)過(guò)敏指?jìng)π源碳は略谑軗p部位及周圍組織或遠(yuǎn)處可產(chǎn)生各種敏感性增強(qiáng)的疼痛或痛覺(jué)過(guò)敏區(qū)域，引起的更加強(qiáng)烈的疼痛。些病理性疼痛是外周和中樞敏感化的結(jié)果。痛覺(jué)過(guò)敏時(shí)機(jī)體對(duì)疼痛的感覺(jué)閾值降低，輕微刺激即可引起疼痛感覺(jué)的現(xiàn)象。利用這個(gè)特點(diǎn)建立了測(cè)試方法。
 

根據(jù)測(cè)試方法及組織對(duì)不同刺激的感受，痛覺(jué)過(guò)敏分為熱痛覺(jué)過(guò)敏和機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏。前者指皮膚損傷后產(chǎn)生持續(xù)性疼痛和痛覺(jué)過(guò)敏，原發(fā)性痛覺(jué)過(guò)敏發(fā)生在組織損傷部位，表現(xiàn)為熱刺激的反應(yīng)增強(qiáng);后者指繼發(fā)性痛覺(jué)過(guò)敏發(fā)生在損傷周圍的正常組織，表現(xiàn)為對(duì)機(jī)械刺激的反應(yīng)增強(qiáng)，如輕觸刺激誘發(fā)疼痛。本研究中采用的方法就是機(jī)械刺激反應(yīng)增強(qiáng)的測(cè)定方法。
 

如上圖所示，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，從造模后第1 天開始，單關(guān)節(jié)炎+氫氣 0～14 d 組大鼠致炎側(cè)后爪的機(jī)械痛敏反應(yīng)較單純單關(guān)節(jié)炎組致炎側(cè)減輕，可維持至第14天，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，但仍高于單關(guān)節(jié)炎+氫氣 0～14d 組健側(cè)后爪，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見圖 1B。就是說(shuō)從建立模型開始給動(dòng)物吸入氫氣，能減少動(dòng)物們的痛覺(jué)敏感性，就是說(shuō)沒(méi)有那么痛了。或者說(shuō)結(jié)果提示氫氣能改善動(dòng)物關(guān)節(jié)炎癥狀。
 

單關(guān)節(jié)炎+氫氣0～3d 組大鼠吸入65% 氫氣后致炎側(cè)后爪的機(jī)械痛敏反應(yīng)與單關(guān)節(jié)炎+氫氣0～14d組變化一致，與單純單關(guān)節(jié)炎組致炎側(cè)、單關(guān)節(jié)炎+氫氣0～3d 組健側(cè)的差異亦均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01;圖 1C)。這個(gè)結(jié)果說(shuō)明，即使只用3天，都可以產(chǎn)生預(yù)防后期炎癥痛的作用。
 

單關(guān)節(jié)炎+氫氣4～14d 組大鼠致炎側(cè)與健側(cè)后爪的機(jī)械痛敏反應(yīng)差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，但與單純單關(guān)節(jié)炎組致炎側(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見圖1D。這個(gè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，一旦炎癥發(fā)生后，使用氫氣效果沒(méi)有那么好了，至少是統(tǒng)計(jì)結(jié)果無(wú)差別。
 

總體上看，氫氣吸入對(duì)于正在發(fā)生的關(guān)節(jié)炎是有效果的，預(yù)防的作用超過(guò)改善作用。
 

論文中這樣看“結(jié)果表明，在單關(guān)節(jié)炎發(fā)生早期給予65%氫氣吸入可以減輕大鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激，減少大鼠關(guān)節(jié)組織破壞，從而阻止機(jī)械痛敏的形成;而在單關(guān)節(jié)炎已經(jīng)形成后，體內(nèi)活性氧相關(guān)物質(zhì)堆積過(guò)多，吸入氫氣后近期效果不明顯，可能需要比14d更長(zhǎng)時(shí)間的氫氣吸入才能顯現(xiàn)出其減輕機(jī)械痛敏及抗氧化的作用。