噪聲性聾(Noise induced hearing loss, NIHL)是指由于長期暴露于損傷性噪聲環(huán)境中引起的以毛細(xì)胞損傷為主要病理機制的進(jìn)行性感音神經(jīng)性聾。NIHL可引起除聽力下降外一系列的生理、心理疾病 。因此，**NIHL防治藥物研究迫在眉睫，目前NIHL藥物防治擁有諸多靶點，但以針對抗氧化應(yīng)激藥物的研究最為廣泛且防治效果顯著。

近年研究表明氫氣對噪聲性聾具有良好的預(yù)防作用，但其對噪聲性聾預(yù)防作用持續(xù)時間尚不明確，本實驗通過建立豚鼠噪聲性聾模型探索氫氣預(yù)防作用持續(xù)時間及防護(hù)機制。

 

方法：選用聽力正常的豚鼠30只，隨機等分為氫氣組和噪聲組，氫氣組在首次脈沖噪聲暴露前給予1h氫氣吸入，兩組動物隨后每隔兩小時重復(fù)施加脈沖噪聲（峰值聲強為163dB SPL）；實驗動物每次暴露后即刻行ABR測聽，所有實驗動物在噪聲暴露結(jié)束后1天、3天、7天、14天行ABR測聽，結(jié)束后處死動物，取材觀察透射電鏡及病理組織染色。

 

結(jié)果：噪聲組動物在噪聲暴露2h（即2×8次脈沖暴露）后監(jiān)測聽力，半數(shù)致聾（聽閾≥90 dB SPL）；氫氣組，此時間推遲至4h左右且基底膜Myosin-7a熒光強度高于噪聲組，底回外毛細(xì)胞丟失數(shù)量少于噪聲組（ P =0.03<0.05）；氫氣組豚鼠耳蝸底回基底膜帶狀突觸數(shù)量減少但仍高于噪聲組（ P =0.65>0.05）；透射電鏡觀察氫氣組豚鼠半結(jié)形態(tài)好于噪聲組。結(jié)論 給予1次氫氣預(yù)防的有效持續(xù)時間為2-4h，氫氣對脈沖聲造成的內(nèi)耳毛細(xì)胞、突觸、半節(jié)損傷均具有一定的保護(hù)效果。

 

研究內(nèi)容：將30只小鼠隨機等分為兩組：噪聲組和氫氣組，每組15只。所有動物在噪聲暴露后第14天聽性腦干反應(yīng)（ABR）測試結(jié)束后處死取耳蝸。

 

選用氫氣發(fā)生器生產(chǎn)氫氣，通過特制管路將氣體輸入臨時飼養(yǎng)箱中，預(yù)充氣15min確保飼養(yǎng)箱內(nèi)氫氣濃度穩(wěn)定在1000ppm，隨后將豚鼠置于飼養(yǎng)箱內(nèi)1小時，吸入結(jié)束后1h行脈沖聲暴露

不同時間點ABR閾值

氫氣組與噪聲組相比，氫氣組可降低16KHz的ABR閾值，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，在兩組豚鼠聽閾≥90dB前，噪聲組豚鼠聽閾始終高于氫氣組，且隨頻率增高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義時間點逐漸增多；噪聲暴露結(jié)束后(6h至14D)聽力恢復(fù)過程中，兩組豚鼠ABR聽閾均明顯下降，氫氣組ABR聽閾明顯低于噪聲組。

噪聲暴露期間折線圖曲線擬合及直線回歸結(jié)果

對噪聲暴露期間ABR數(shù)據(jù)進(jìn)行曲線擬合及直線回歸，各頻率的直線回歸方程氫氣組斜率均>噪聲組，氫氣組擬合曲線各頻率在4h時斜率開始變陡。

Myosin-7a免疫熒光染色及熒光半定量分析

相較于正常豚鼠耳蝸基底膜Myosin-7a染色，噪聲組與氫氣組Myosin-7a染色熒光強度均出現(xiàn)下降，但氫氣組熒光強度仍高于噪聲組。

五角星代表丟失的外毛細(xì)胞

正常豚鼠耳蝸基底膜鋪片可見3排外毛細(xì)胞排列整齊、無缺失，噪聲組與氫氣組毛細(xì)胞均出現(xiàn)丟失，但氫氣組外毛細(xì)胞丟失數(shù)量明顯少于噪聲組。

琥珀酸脫氫酶染色

 

正常豚鼠毛細(xì)胞SDH染色均勻深染，噪聲組基底膜染色可見著色變淺,片狀無染色區(qū)并毛細(xì)胞腫脹，氫氣組同樣上述改變但明顯輕于噪聲組。

 

總結(jié)：已有學(xué)者證實，氫氣在動物模型中對NIHL具有**的防治意義 ，但氫氣對脈沖噪聲引起的NIHL是否同樣具有優(yōu)秀的防治效果及其防治持續(xù)時間尚不明確。相較于穩(wěn)態(tài)噪聲，脈沖噪聲具有更高的機械能，可對內(nèi)耳造成更嚴(yán)重的機械損傷與代謝損傷。本實驗通過建立動物模型及相關(guān)病理形態(tài)學(xué)學(xué)分析，證實氫氣對脈沖聲所致NIHL具有顯著的預(yù)防作用，并可有效降低噪聲對內(nèi)耳毛細(xì)胞、半節(jié)的損傷作用，提示氫氣對隱性聽力損失同樣具有預(yù)防意義。

 

參考文獻(xiàn)：

·費一堅.進(jìn)行性視網(wǎng)膜變性疾病的研究進(jìn)展[J].中華眼底病雜志,1999,15(4):262-264.

·Hickman TT, Smalt C, Bobrow J, et al. Blast-induced cochlearsynaptopathy in chinchillas[J]. Sci Rep, 2018, 8(1): 10740.

·李國慶,呂萍,王秋菊.隱性聽力損失的發(fā)病機制及聽力學(xué)表現(xiàn)[J].中華耳科學(xué)雜志, 2017, 15(2): 185-190.

·楊衛(wèi)平,胡博華.噪聲暴露后耳蝸凋亡與壞死毛細(xì)胞琥珀酸脫氫酶活性的變化[J].中華耳科學(xué)雜志, 2007, 5(2):198-201