氫氣在調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)及相關(guān)microRNAs表達(dá)中的作用

作者：admin發(fā)布日期：2024-06-03 09:49瀏覽次數(shù)：

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動(dòng)脈粥樣硬化是心腦血管疾病常見的病理基礎(chǔ),它是一種慢性炎癥疾病。微小RNA(micro RNAs,miRNAs)參與了動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展,其中抗炎基因miRNA-146a通過靶向IRAK1和TRAF6的表達(dá)、miRNA-181b通過靶向importin-α3的表達(dá)來抑制核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信號通路的激活,促炎基因miRNA-92a則加劇炎癥反應(yīng)。他們通過調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中下游靶基因的表達(dá),進(jìn)而影響細(xì)胞功能,最終影響動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程。

而且有研究發(fā)現(xiàn),在正常和動(dòng)脈粥樣硬化的人體中,這三種miRNAs的表達(dá)具有顯著差異。在動(dòng)脈粥樣硬化的患者,抗炎基因miRNA-146a和miRNA-181b的表達(dá)下調(diào),促炎基因miRNA-92a的表達(dá)上調(diào)。而通過調(diào)控炎癥反應(yīng)相關(guān)miRNAs的表達(dá),能顯著抑制疾病的進(jìn)程。氫氣具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、調(diào)控miRNAs表達(dá)等作用,并且具有較高的生物安全性,可以和多種藥物起到良好的協(xié)同作用。在保證了臨床應(yīng)用前景的同時(shí),又可以有效避免臨床應(yīng)用中的并發(fā)癥。因此,本論文旨在研究氫氣在動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的三種細(xì)胞的炎癥反應(yīng)及miRNAs(miRNA-146a、miRNA-181b、miRNA-92a)表達(dá)中的作用,在細(xì)胞及分子層面上探討氫氣的作用,為之后氫氣在動(dòng)脈粥樣硬化疾病中的深入研究提供了基礎(chǔ)和參考。相比較傳統(tǒng)的反復(fù)更換富氫培養(yǎng)基的方法,本文根據(jù)專利制備了可以長期提供穩(wěn)定氫氣濃度的富氫培養(yǎng)體系。

在此基礎(chǔ)上,本論文進(jìn)一步探索了氫氣在動(dòng)脈粥樣硬化中的應(yīng)用前景。在動(dòng)脈粥樣硬化的病理進(jìn)程中,由于病變部位的持續(xù)性炎癥,會(huì)造成內(nèi)皮細(xì)胞損傷、平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化和巨噬細(xì)胞釋放炎性因子。所以本文通過脂多糖(LPS)對內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞進(jìn)行炎癥造模,然后在富氫培養(yǎng)體系中進(jìn)行培養(yǎng),由流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況,證明氫氣具有較好的抗內(nèi)皮細(xì)胞凋亡作用;由q PCR和ELISA檢測血管細(xì)胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)與細(xì)胞間粘附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的表達(dá),證明氫氣能夠減少內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥狀態(tài)下分泌的粘附分子,對動(dòng)脈粥樣硬化早期炎癥反應(yīng)起到了一定的治療作用。通過免疫熒光對α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)進(jìn)行檢測,通過q PCR對平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化相關(guān)基因α-SMA、肌球蛋白重鏈11(myosin heavy chain 11,MYH11)和失調(diào)蛋白1(spinocerebellar ataxia type 1,SCA1)進(jìn)行檢測,證明了氫氣可以遏制脂多糖誘導(dǎo)的平滑肌表型向分泌型轉(zhuǎn)化。利用q PCR和ELISA檢測巨噬細(xì)胞炎癥因子,證明氫氣可以減少LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞中促炎因子白細(xì)胞介素6(interleukin 6,IL-6)與腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表達(dá),增加抗炎因子轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)的表達(dá)。并且,氫氣在三種細(xì)胞中均可以增加抗炎基因miRNA-146a和miRNA-181b的表達(dá),減少促炎基因miRNA-92a的表達(dá)。綜上所述,本文旨在探索氫氣在動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)及相關(guān)miRNAs表達(dá)中的作用,并在細(xì)胞學(xué)水平上證明了氫氣在治療動(dòng)脈粥樣硬化的潛力。