研究背景2型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)作為一種以血糖升高為主要特征的代謝紊亂性疾病,與動脈粥樣硬化疾病(Atherosclerosis,AS)密切關聯(lián)。作為代謝綜合征的一種,由T2DM引起的血管內(nèi)皮功能受損、輕度炎癥反應、脂肪細胞因子激活、血脂代謝異常以及血栓危險和纖溶系統(tǒng)受抑制等多種因素共同參與了AS的疾病進展。對T2DM患者的死因分析資料顯示心腦血管疾病是T2DM患者死亡的主因。T2DM合并發(fā)生心血管疾病(Cardiovascular diseases,CVDs)分析表明脂質代謝紊亂是其主要危險因素,脂代謝紊亂合并脂蛋白功能障礙在其發(fā)生、發(fā)展過程中起到了重要作用。其中脂蛋白功能障礙尤其是高密度脂蛋白(High-density lipoprotein,HDL)功能障礙糖尿病疾病進展中發(fā)揮著重要的作用。2007年,來自日本的學術團體發(fā)現(xiàn)氫分子可以作為一種抗氧化劑改善腦缺血后再灌注產(chǎn)生的氧化損傷,并由此開啟了氫氣對機體作用研究的熱潮。已有相關研究證實,給予2型糖尿病伴肥胖小鼠模型長期飲用富氫水后,肝丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平、脂肪含量以及血糖和血甘油三酯(Triglyceride,TG)水平等均出現(xiàn)不同程度降低。而本課題組前期的人體試驗研究發(fā)現(xiàn),飲用氫氣可通過激活膽固醇流出調節(jié)蛋白活性來促進高脂血癥患者胞內(nèi)膽固醇的流出,提高HDL抗動脈硬化和調節(jié)血脂的功能。對于糖尿病患者體內(nèi)的HDL,其功能紊亂可能是由于體內(nèi)高血糖的氧化作用使HDL產(chǎn)生非酶促糖基化修飾形成糖基化HDL,進而導致HDL功能障礙。由于目前氫氣水對于糖尿病患者HDL功能調節(jié)作用的人體試驗尚無報道,因此本研究采取隨機雙盲安慰劑對照法,在受試終點驗證氫氣水對糖尿病患者HDL功能的影響。研究目的本次研究采用隨機性雙盲安慰劑對照的方法,探索氫氣水對T2DM患者體內(nèi)HDL多種功能的調節(jié)作用。
研究對象和方法1、病例篩選:招募泰安某社區(qū)內(nèi)74名T2DM患者(40–70歲)作為受試人群,參考2010年美國糖尿病協(xié)會(ADA)糖尿病診斷標準,受試人群入選標準為:(1)糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)≥6.5%;(2)空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L(對空腹的限定為最少8小時之內(nèi)并無熱量的攝入情況);(3)OGTT時2小時后血糖≥11.1mmol/L,符合上述之一并排除(1)1型胰島素依賴型糖尿病患者;(2)糖耐量受損(IGT)患者;(3)其它類型糖尿病,包括繼發(fā)性原因引起的糖尿病,以及某些家族遺傳性作用引起的糖尿病。在試驗全程時間范圍內(nèi)個體的生活方式、飲食結構方式及一般服用藥物情況保持不出現(xiàn)變動。2、臨床干預:選取泰安市粥店社區(qū)T2DM患者74例后,根據(jù)性別、年齡、血糖及糖化血紅蛋白水平分為對照組(安慰劑組)和實驗組(氫氣水組),每組37例。試驗周期為10周。實驗組每人每日飲用氫氣水735mL/d,對照組每人每日飲用安慰劑純凈水735mL/d,飲用方法均為每日三次,每次245ml。血樣采集時間為0、10周末。3、實驗室檢測:空腹條件下采集參與受試患者的靜脈血,靜置后離心取得各組患者血漿,使用低溫超速離心法分別分離出極低密度脂蛋白(Very low density lipoprotein,VLDL)、低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)、HDL;通過膽固醇逆向轉運實驗檢測HDL對巨噬細胞內(nèi)膽固醇溢出的作用;通過HDL對銅離子誘導的低密度脂蛋白氧化的保護作用來檢測HDL的對抗氧化的能力;通過MTT比色法檢測人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Huvec)的相對細胞存活率(%);通過流式細胞技術檢測內(nèi)皮細胞凋亡水平來檢測HDL所能發(fā)揮的抗凋亡作用;通過內(nèi)皮細胞與單核細胞粘附試驗檢測ox-LDL對內(nèi)皮細胞的刺激作用以及HDL對內(nèi)皮細胞的保護。結果本課題研究發(fā)現(xiàn),兩組患者分別干預10周后,相對于對照組,實驗組HDL抑制ox-LDL誘導的EC炎癥反應的作用增強;實驗組HDL抑制LDL中氧化應激反應的作用增強;實驗組HDL抑制ox-LDL誘導Thp-1單核細胞與Huvec內(nèi)皮細胞粘附效應的作用增強;實驗組HDL的膽固醇逆轉運功能增強。結論本課題研究表明,兩組患者分別飲用安慰劑水和氫氣水10周后,統(tǒng)計學研究表明,實驗組與對照組比較,氫氣水作用總結如下:1、氫氣水明顯改善T2DM人群HDL的抗炎性反應作用;2、氫氣水改善T2DM人群HDL的抗氧化應激作用;3、氫氣水改善T2DM人群HDL的內(nèi)皮細胞保護作用;4、氫氣水改善T2DM人群HDL逆向轉運膽固醇的作用。
