奶業(yè)是我國畜牧業(yè)的重要組成部分,對(duì)我國的經(jīng)濟(jì)發(fā)展起著重要作用。奶牛乳頭損傷對(duì)奶牛產(chǎn)奶量具有較大影響,威脅奶業(yè)的健康發(fā)展。冬季惡劣的氣候條件以及藥浴液的頻繁使用是引起奶牛乳頭損傷的主要因素。因此奶牛場(chǎng)中奶牛乳頭損傷問題需要引起重視。近年來,隨著對(duì)氫氣研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)氫通過清除毒性自由基而具有選擇性抗氧化的作用,在促進(jìn)傷口愈合方面也有顯著的療效。因此氫已經(jīng)成為一種發(fā)展?jié)摿薮蟮闹委熜詺怏w。鑒于氫的治療特性,本研究通過MAC-T細(xì)胞和KM小鼠模型以及荷斯坦奶牛臨床試驗(yàn),探究氫氣對(duì)于奶牛乳頭皮膚的氧化損傷和創(chuàng)傷的保護(hù)作用。為了探究氫氣對(duì)聚維酮碘（PVP-I）引起的MAC-T細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng)的作用,本試驗(yàn)將細(xì)胞隨機(jī)分為對(duì)照組（Control）、氫氣組（H2）、氧化應(yīng)激組（PVP-I）、氧化應(yīng)激+氫氣組（PVP-I+H2）。

首先是明確PVP-I對(duì)細(xì)胞的影響,先將MAC-T細(xì)胞在不同濃度的PVP-I下處理2h建立氧化損傷模型,并使用CCK8測(cè)定了不同濃度情況下的細(xì)胞活力。根據(jù)細(xì)胞活力變化程度,本試驗(yàn)選擇PVP-I濃度為12.8mmo L,處理時(shí)間為2小時(shí)的試驗(yàn)條件。其次,使用富氫細(xì)胞培養(yǎng)液處理細(xì)胞2h,檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)的變化。通過蛋白免疫印跡法（Western Blot）檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)核因子相關(guān)因子2（Nrf2）和血紅素加氧酶1（HO1）的表達(dá)情況;通過流式細(xì)胞術(shù)分析由PVP-I刺激后細(xì)胞內(nèi)活性氧ROS的水平以及細(xì)胞死亡情況;同時(shí)用試劑盒檢測(cè)丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽還原酶（GSH）的變化。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果得出,氫氣緩解了PVP-I造成的MAC-T細(xì)胞的活性下降,減少了細(xì)胞內(nèi)ROS的積累,抑制了PVP-I所致的氧化應(yīng)激。說明氫通過維持氧化還原系統(tǒng)的平衡緩解了PVP-I引起的MAC-T細(xì)胞氧化損傷。為了評(píng)估氫氣的應(yīng)用效果,本研究將甘油作為富氫載體制備含氫甘油以增加對(duì)皮膚的滲透性,同時(shí)通過小鼠皮膚創(chuàng)傷模型和奶牛臨床試驗(yàn)進(jìn)一步探索氫氣對(duì)奶牛乳頭皮膚的氧化損傷和創(chuàng)傷的保護(hù)作用。首先將30只小鼠隨機(jī)分為三組,分別是對(duì)照組（Control）,甘油組（Gly）,富氫甘油組（HRG）。處理方式為對(duì)皮膚創(chuàng)口進(jìn)行涂抹,早、中、晚各涂抹一次,連續(xù)涂抹一周,觀察皮膚愈合狀態(tài)。根據(jù)皮膚愈合率對(duì)比結(jié)果得出,富氫甘油涂抹可以加速小鼠皮膚創(chuàng)口的愈合。同時(shí),將30頭荷斯坦奶牛分為三個(gè)組,分別是藥浴液組（PVP-I）、藥浴液+甘油組（HRG+PVP-I）、藥浴液+富氫甘油組（PVP-I+HRG）。處理方式為奶牛乳頭涂抹,早、中、晚各涂抹一次,連續(xù)涂抹兩個(gè)月,然后觀察奶牛乳頭皮膚的狀態(tài)。根據(jù)各組之間的皮膚狀態(tài)對(duì)比得出,藥浴液+富氫甘油組的奶牛乳頭皮膚褶皺減少、表面更光滑,表明富氫甘油可以減輕由藥浴液引起乳頭皮膚的氧化損傷。綜上所述,氫可以通過維持氧化還原系統(tǒng)的平衡緩解PVP-I引起的MAC-T細(xì)胞氧化損傷,富氫甘油可以促進(jìn)小鼠皮膚創(chuàng)口的愈合以及改善藥浴液引起的奶牛乳頭皮膚狀態(tài)。本研究證明了氫對(duì)于動(dòng)物臨床皮膚氧化損傷和創(chuàng)傷的臨床應(yīng)用價(jià)值,為氫氣在畜牧業(yè)的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。