研究背景:近年來(lái),越來(lái)越多的報(bào)道表明,作為一種新型抗氧化劑,氫對(duì)短暫性腦缺血、新生兒腦低氧缺血、冷缺血再灌注損傷以及異體心臟和主動(dòng)脈受體炎癥相關(guān)性惡化等器官損傷具有保護(hù)作用。氫分子是一種新興的治療性醫(yī)療氣體,可用于包括帕金森病、糖尿病、骨質(zhì)疏松癥等一些退行性疾病的治療。據(jù)報(bào)道,在高血壓大鼠中,注射富氫生理鹽水可減輕左心室肥厚和血管功能障礙。目前主要有吸入氫氣法、注射富氫鹽水法和飲用富氫水法作為常見(jiàn)處理方法。與氫氣相比,富含氫的鹽水和水更為安全、經(jīng)濟(jì)、容易獲得。在牙科中,動(dòng)物研究表明,富氫水(HW Hydrogen-Rich Water)可以減輕老化和牙周病引起的牙齦氧化應(yīng)激。最近的一項(xiàng)研究也顯示,飲用HW激活了抗氧化防御的基因表達(dá),有助于促進(jìn)大鼠口腔黏膜創(chuàng)面的愈合。牙齦氧化應(yīng)激參與了牙槽骨吸收的進(jìn)程。研究表明大鼠通過(guò)飲用HW抑制肥胖可通過(guò)限制牙齦氧化應(yīng)激減輕牙槽骨吸收。研究目的:通過(guò)富氫水滴定實(shí)驗(yàn)確定制備出富氫水后其最適濃度時(shí)間范圍;建立比格犬下頜骨種植體周?chē)装Y模型,測(cè)定富氫水對(duì)植體周軟、硬組織炎癥的抑制作用;通過(guò)對(duì)樣本內(nèi)RNA測(cè)序探究在富氫水的作用下細(xì)菌含量的變化。材料與方法:(1)種植體周?chē)啄Ｐ偷慕?三只比格犬雙側(cè)下頜第一、第二、第三、第四前磨牙拔牙后即刻種植,三個(gè)月后行二期手術(shù),上愈合基臺(tái),同期放入細(xì)絲線(xiàn)結(jié)扎,之后每隔兩周用牙周探針對(duì)植體溝內(nèi)出血、溢膿及探診深度測(cè)定及X線(xiàn)片觀(guān)察驗(yàn)證是否建模成功(2)對(duì)飽和富氫水不同時(shí)間內(nèi)氫離子濃度的測(cè)定:機(jī)器制備出飽和富氫水,分別在放置不同時(shí)間段后,將富氫水滴定液滴入,計(jì)算出其濃度,從而得出最適宜的實(shí)驗(yàn)時(shí)間。富氫水、去離子水每日兩次分別沖洗植體周?chē)?每?jī)芍軠y(cè)定植體牙齦指數(shù)(GI),改良出血指數(shù)(mSBI),探診深度(PD)平均值,同時(shí)提取齦溝液(3)用ELISA試劑盒測(cè)定IL-1,IL-6,MMPs的表達(dá)變化梯度;處死比格犬后,PCR檢測(cè)植體周骨組織內(nèi)兩組中IL-1,IL-6,MMPs的表達(dá);HE染色觀(guān)察兩組中驗(yàn)證分布趨勢(shì)(4)取第六周植體周齦溝液,PCR擴(kuò)增,16SRNA測(cè)序,生信分析,檢測(cè)兩組內(nèi)細(xì)菌差異結(jié)果:(1)6周后,臨床觀(guān)察得出植體周軟組織出血、溢濃,且探診達(dá)5 mm以上,X線(xiàn)片示牙槽骨角型吸收。(2)三次富氫水滴定實(shí)驗(yàn)得出最適濃度時(shí)間范圍在制備出富氫水后的5 min內(nèi);實(shí)驗(yàn)第0周、第2周、第4周和第6周對(duì)植體周臨床指標(biāo)(GI、mSBI、PD)進(jìn)行測(cè)量得出實(shí)驗(yàn)組中各項(xiàng)臨床指標(biāo)均有下降,但與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(3)使用ELISA試劑盒對(duì)炎癥因子(IL-1、IL-6、MMPs)定量分析得出實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組有明顯差異(P≤0.01),尤其在前兩周內(nèi)實(shí)驗(yàn)組炎癥因子下降趨勢(shì)較為顯著;HE染色結(jié)果得出實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比炎癥細(xì)胞有減小趨勢(shì)。對(duì)樣品內(nèi)骨組織PCR測(cè)定,對(duì)照組中IL-1、IL-6和MMPs的表達(dá)量顯著高于實(shí)驗(yàn)組,測(cè)得結(jié)果且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)齦溝液內(nèi)16SRNA測(cè)序得出實(shí)驗(yàn)組相較對(duì)照組中,卟啉單胞菌屬,梭桿菌屬等致病菌含量降低,且P≤0.01。
結(jié)論:(1)富氫水機(jī),采用固體聚合物質(zhì)子交換純水電解技術(shù)制備富氫水,應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)制備;(2)細(xì)絲線(xiàn)結(jié)扎法加高糖軟食喂養(yǎng)誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性種植體周?chē)卓沙晒⒎N植體周?chē)装Y模型;(3)富氫水對(duì)實(shí)驗(yàn)性種植體周?chē)装Y的進(jìn)展有抑制作用
